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Les approches biochimiques, chromatographiques et électrophorétiques se complètent et fournissent chacune des arguments positifs en faveur de notre hypothèse de départ.
Le groupe de corynébactéries CPAP présente des ressemblances évidentes au niveau du profil protéique, et se différencie nettement des autres espèces par la présence caractéristiques de 4 ou 5 bandes protéiques, situées entre 40 et 50 KDa.
Quelques soit leur comportement biochimique, on les retrouve distribuées parmi les 3 ou 4 profils décrits plus haut, ne représentant que de petites variations.
L’identification des acides gras cellulaires a permis de mettre en évidence 2 pics caractéristiques au sein de ce groupe : l’acide heptadécanoïque (C17 :0) et son dérivé, non identifié de façon précise. Ces acides gras à nombre impair d’atomes de carbone sont particulièrement peu fréquent dans la nature.
L’acide gras C17 :0 n’est mentionné que chez C. mycetoïdes, non repris dans notre étude et peu fréquent chez l’homme, seuls quelques ulcères tropicaux ayant été rapportés par Castellani en 1942.
Au sein des corynébactéries CPAP, on peut essayer de regrouper les souches en fonction des proportions relatives des pics d’acides gras.
Le nombre de combinaisons possibles est très élevé et ne permet pas de corréler un sous-groupe à un caractère phénotypique particulier.
Mais il est intéressant de remarquer, que là encore, les corynébactéries CPAP, qu’elles appartiennent à l’espèce minutissimum 1, au groupe I, groupe F, ou au groupe X, se répartissent dans tous les sous-groupes ainsi formés ;
Biochimiquement, ces souches hétérogènes selon les critères conventionnels que l’on pourrait considérer comme arbitraires (NR, uréase, fermentation du maltose et du saccharose), manifestent cependant de l’homogénéité dans plusieurs autres caractères tels que l’attaque du ribose, la présence de phosphatase alcaline, l’absence de glycyl-glycine arylamidase, de tween-estérase.
A priori, il n’y a pas de raison valable d’accorder plus de poids à la fermentation du maltose plutôt qu’à celle du ribose ou d’un autre sucre.
Notre étude semble fournir des éléments probants suffisants pour entamer une étude génétique complète des souches, sans laquelle aucune définition taxonomique n’est possible de nos jours.
L’apparition de plus en plus fréquente en milieu hospitalier, de ces germes de nature opportuniste présentant un danger certain vu leur plus grande résistance aux antibiotiques, justifie leur identification précise.
Nous avons obtenu à cet effet une collaboration avec l’Institut Pasteur de Paris, où ces couches sont pour l’instant étudiées dans le laboratoire de P.A.D. Grimont. Ceci afin d’établir par hybridation ADN/ADN les relations taxonomiques qui existent entre elles d’une part, et d’autres part les comparer aux souches types des autres espèces de corynébactéries rencontrées chez l’homme.
Tout en soulignant le mérite du Pr. Peloux, qui le premier a mise en évidence l’importance de l’acide propionique et proposé une subdivision des espèces minutissimum et xerosis basée sur ce caractère, le choix de sa nomenclature nous semble peu judicieux.
L’ensemble de notre étude démontre bien le peu de ressemblances existant entre C. minutissimum 1 appartenant au groupe CPAP et C. minutissimum 2, de même entre C. xerosis 2 et C. xerosis 1, qui se rapprocherait de nos souches du groupe X.
Un ou plusieurs nouveaux termes complètement indépendants devraient être choisis. Si les résultats d’hybridation ADN/ADN confirment notre hypothèse, l’aspect cireux des colonies du groupe CPAP pourrait être repris dans le nouvelle nomenclature.
Notre second objectif était d’apporter une aide dans l’identification quotidienne en laboratoire des corynébactéries. Quelques tests faciles, rapides et peu coûteux permettent une première orientation.
Nous avons mis au point un schéma dichotomique, utile dans une première approche, mais qui doit être complété si nécessaire.
La chromatographie en phase gazeuse, lorsqu’elle est disponible et bien utilisée, représente un outil de choix, performant et rapide, fournissant l’identification du genre Corynebacterium sans équivoque (acide gras à longue chaîne) , l’identification de l’espèce dans certains cas (ex. C. groupe D2) et des renseignements supplémentaires discriminants tels que le production d’acide propionique.
Les galeries d’identification commerciales, beaucoup plus coûteuses, peuvent attirer certains laboratoires par leur simplicité d’utilisation et leur large éventail.
Il faut pourtant garder son sens critique, ne pas se fier aveuglément à un résultat correspondant en fait à un pourcentage de probabilités souvent peu élevé, et confirmer éventuellement l’identification par des tests supplémentaires.
Nous terminerons, en proposant un tableau général, reprenant les principaux caractères discriminants au sein du genre Corynebacterium.
Ce tableau d’identification a le mérite de rassembler des données importantes, fragmentées jusqu’à ce jour. Il permet d’établir un lien entre la classification de Peloux, celle du CDC, et celle du Bergey’Manual of Systematic Bacteriology.

Corynebacterium --- Medical Laboratory Science

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